一、產(chǎn)品原理
數(shù)字PCR是一種核酸分子絕對(duì)定量檢測(cè)方法,核心原理是通過(guò)有限稀釋、PCR和泊松分布實(shí)現(xiàn)不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線的絕對(duì)定量檢測(cè)技術(shù)。
該系統(tǒng)相比于qPCR技術(shù)具有的絕對(duì)定量、靈敏度高、抗抑制劑干擾的優(yōu)勢(shì),在病原體絕對(duì)定量,CNV拷貝數(shù)變異、稀有突變檢測(cè)、微小基因相對(duì)表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因檢測(cè)、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、基因編輯、液體活檢、遺傳病檢測(cè)、病原微生物檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域得到一系列的研究成果和應(yīng)用轉(zhuǎn)化。
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、核心技術(shù)
1) VibroJect振動(dòng)注射技術(shù),是全球首款“主動(dòng)式液滴生成”方法。具有實(shí)時(shí)監(jiān)控、在線分析、無(wú)需標(biāo)記、無(wú)損細(xì)胞、靈敏度高等特點(diǎn)。待測(cè)的反應(yīng)體系在精密注射泵的作用下,從微型加樣吸頭中流出,同時(shí)對(duì)加樣吸頭進(jìn)行一定頻率的往復(fù)振動(dòng),待測(cè)反應(yīng)體系會(huì)在剪切力的作用下被分割為體積均一的液滴。
2) 液滴大小可編輯:樣本吸取、液滴生成全過(guò)程自動(dòng)化、無(wú)死體積,最大化樣本利用率。
a)高分辨率模式:15ul~37k-45k
b)標(biāo)準(zhǔn)模式:20ul~23k
c)高靈敏度模式:40ul~9k-11k
二、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1)一體化設(shè)計(jì):搭載液滴生成模塊,PCR擴(kuò)增模塊,熒光拍照模塊。一臺(tái)儀器自動(dòng)完成所有實(shí)驗(yàn),反應(yīng)液進(jìn)-結(jié)果出,僅需1.5-2小時(shí),無(wú)需外接電腦。
2)操作簡(jiǎn)單:8連管直接上樣,1分鐘完成上機(jī)操作,無(wú)需手工轉(zhuǎn)移樣本或芯片。
3)靈活上樣:1-16/24兩種耗材規(guī)格可選,滿足不同檢測(cè)通量需求,僅需6h即可完成96個(gè)樣品的檢測(cè)。
4)多溫控模式:高性能溫控模塊,保證溫度均一性可實(shí)現(xiàn)數(shù)字PCR溫度梯度。
5)3-6色熒光:最高可配備6色熒光,最多支持21組熒光片組合,兼容幾乎所有熒光染料。
隨著技術(shù)的不斷創(chuàng)新與進(jìn)步,數(shù)字PCR儀在水環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用前景也十分廣闊。對(duì)水中的病原體、污染物、重金屬等物質(zhì)均可檢測(cè)。如,通過(guò)檢測(cè)水中的病原微生物(如HIV、HBV等),可以評(píng)估水質(zhì)安全;通過(guò)檢測(cè)水中的重金屬和有機(jī)污染物,可以評(píng)估水體的污染程度?。其適用廣、重復(fù)好等優(yōu)勢(shì)為水環(huán)境管理和保護(hù)提供了有利支持。
數(shù)字PCR(dPCR)在水環(huán)境病原微生物檢測(cè)方面具有顯著優(yōu)勢(shì),主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
1. 高靈敏度和特異性:數(shù)字PCR能夠精確檢測(cè)到水樣中低豐度的病原微生物,即使在復(fù)雜的環(huán)境中,也能有效分離和識(shí)別目標(biāo)病原體。
2. 定量分析:與傳統(tǒng)PCR相比,數(shù)字PCR能夠提供更準(zhǔn)確的定量結(jié)果,使得研究人員可以精確測(cè)量水中病原微生物的數(shù)量,從而評(píng)估其潛在風(fēng)險(xiǎn)。
3. 多重檢測(cè)能力:數(shù)字PCR能夠同時(shí)檢測(cè)多種病原體,通過(guò)多重反應(yīng)實(shí)現(xiàn)對(duì)不同微生物的快速識(shí)別,提高檢測(cè)效率。
4. 快速反應(yīng)時(shí)間:數(shù)字PCR的檢測(cè)速度快,通??梢栽趲讉€(gè)小時(shí)內(nèi)獲得結(jié)果,這對(duì)于水質(zhì)監(jiān)測(cè)和公共衛(wèi)生應(yīng)急響應(yīng)至關(guān)重要。
5. 應(yīng)用廣泛:數(shù)字PCR可用于檢測(cè)多種水源中的病原微生物,包括飲用水、污水、地表水等,幫助評(píng)估水質(zhì)安全。
6. 環(huán)境監(jiān)測(cè):可用于監(jiān)測(cè)水體污染事件,識(shí)別污染源和傳播途徑,為水環(huán)境管理提供數(shù)據(jù)支持。
7. 公共衛(wèi)生:在公共衛(wèi)生領(lǐng)域,數(shù)字PCR能夠幫助識(shí)別水源污染與疾病爆發(fā)之間的關(guān)聯(lián),促進(jìn)更有效的疾病預(yù)防和控制措施。
總體而言,數(shù)字PCR技術(shù)為水環(huán)境病原微生物檢測(cè)提供了強(qiáng)有力的工具,推動(dòng)了水質(zhì)安全監(jiān)測(cè)和公共健康研究的發(fā)展。
數(shù)字PCR(dPCR)在有害藻華研究中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
1. 定量分析:數(shù)字PCR能精確測(cè)定有害藻類的豐度,幫助研究者評(píng)估藻華的嚴(yán)重程度和時(shí)空分布。
2. 種類識(shí)別:通過(guò)特異性引物,數(shù)字PCR能夠快速準(zhǔn)確地識(shí)別不同有害藻類,促進(jìn)對(duì)藻華成因的深入了解。
3. 早期預(yù)警:利用數(shù)字PCR的靈敏性,可以在藻華發(fā)生前進(jìn)行監(jiān)測(cè),提供早期預(yù)警,幫助管理和應(yīng)對(duì)藻華事件。
4. 環(huán)境影響評(píng)估:可用于研究水體中環(huán)境因素(如營(yíng)養(yǎng)鹽濃度、溫度等)對(duì)有害藻類生長(zhǎng)的影響,揭示生態(tài)變化的機(jī)制。
5. 基因功能研究:數(shù)字PCR能夠幫助研究與有害藻類毒性相關(guān)的基因,深入探討其生理和生態(tài)功能