花粉活力分析儀的應(yīng)用:甘藍型油菜異源六倍體基因穩(wěn)定性研究
日期:2025-02-17 14:32:19

多倍體在植物界普遍存在,因擁有多個染色體組,多倍體常表現(xiàn)出雜種優(yōu)勢,即細(xì)胞、器官通常較大,如出現(xiàn)“巨型” 效應(yīng),花粉和氣孔等也增大,在作物中常表現(xiàn)為植株高大、生物量增加等,在進化過程中,多倍體可能獲得更強的環(huán)境適應(yīng)能力,包括對生物脅迫(如病蟲害)和非生物脅迫(如干旱、鹽堿、溫度變化等)的耐受性提高。這使得它們能夠在更廣泛的生態(tài)環(huán)境中生存和繁衍,拓寬了植物的生態(tài)幅。

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甘藍型油菜屬十字花科蕓薹屬,其雖存在多種二倍體和自然發(fā)生的異源四倍體品系,但并不存在自然的異源六倍體(2n=AABBCC),只能通過人工合成(如種間雜交后染色體加倍或利用未減數(shù)配子融合),而新合成的甘藍型油菜異源六倍體普遍存在基因組不穩(wěn)定的情況。本研究選用了naponigra(B.napus x B.nigro)、carirapa(B.carinata x B.rapa)、junleracea(B. juncea × B. oleracea)和NCJ(B. napus × B. carinata × B. juncea)這四種人工合成的甘藍型油菜異源六倍體(2n = AABBCC = 54)作為研究材料,通過Illumina Infinium Brassica 90K SNP 陣列基因分型、分子核型分析、染色體計數(shù)、花粉活力檢測(瑞士Amphasys,Ampha Z30)、雜交實驗、DNA 提取與SNP 分析等多種實驗方法,探究了其基因組穩(wěn)定性、染色體遺傳、種子育性和雜交親和性等方面的規(guī)律。結(jié)果顯示,不同基因型和譜系的異源六倍體基因組穩(wěn)定性差異顯著,僅3.2% 為整倍體,存在大量拷貝數(shù)變異(CNV)和染色體易位等結(jié)構(gòu)變異,且未發(fā)現(xiàn)普遍穩(wěn)定的重排模式,但某些區(qū)域更易發(fā)生重組。染色體遺傳復(fù)雜,不同親本組合和世代植株染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)多樣,與育性無簡單對應(yīng)關(guān)系,部分非整倍體可育,整倍體育性也有差異。不同異源六倍體間雜交多數(shù)可行,平均每花芽結(jié)籽0-4.6 粒,母本基因型影響顯著,新的 F? 雜種育性和穩(wěn)定性與親本相似,雜交未顯著改善基因組穩(wěn)定性。

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其中,花粉活性檢測在此項研究中具有以下意義

反映育性水平:花粉活性與種子生產(chǎn)密切相關(guān),是衡量植物育性的關(guān)鍵指標(biāo)之一。研究發(fā)現(xiàn)部分植株花粉活性低(如62% 的植株花粉活性 <50%,僅6%>80%,naponigra部分基因型花粉發(fā)育差甚至無活力),且與種子產(chǎn)量存在一定關(guān)聯(lián)(如總種子數(shù)和花粉活力弱相關(guān),自交種子數(shù)與花粉活力、開花時間也有一定相關(guān)性),有助于理解植物繁殖能力和生殖效率。

輔助雜交研究:在雜交實驗中,花粉活性影響雜交成功率和后代遺傳組成。了解花粉活性可解釋不同雜交組合種子產(chǎn)量差異,為選擇合適親本和雜交方向提供依據(jù),如某些雜交組合因花粉活性問題導(dǎo)致結(jié)籽少,而合適的親本組合可提高雜交效果。

探究基因組穩(wěn)定性:花粉發(fā)育和活性受基因組穩(wěn)定性影響,減數(shù)分裂異常會改變花粉活性。研究花粉活性有助于間接推斷基因組穩(wěn)定性,如在分析異源六倍體減數(shù)分裂穩(wěn)定性和CNV 對植物影響時,花粉活性可作為參考指標(biāo),與其他數(shù)據(jù)共同揭示基因組變化規(guī)律。

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用于雜交的不同蕓薹屬異源六倍體基因型的花粉活力百分比

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蕓薹屬異源六倍體親本基因型(P1和P2)及其相應(yīng)的F1雜種產(chǎn)生的總種子數(shù)

研究結(jié)果表明,甘藍型油菜異源六倍體基因組有一定耐受性,但穩(wěn)定性低且不受強烈正向選擇,雜交可增加遺傳多樣性,但多數(shù)F?雜種未優(yōu)于親本。本研究雖取得一定成果識別出部分穩(wěn)定材料和潛在育種價值的染色體變化,但仍需深入探究其基因組穩(wěn)定性的遺傳機制、提高育性和穩(wěn)定遺傳的方法,以及如何有效利用其潛在優(yōu)勢培育新的甘藍型油菜作物品種,以滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對優(yōu)良品種的需求。

原文
D Quezada-Martinez, J Batley, AS Mason. Karyotype instability varies by species and genotype combination in allohexaploid Brassica[J]. bioRxiv, 2023.09.22.559010.
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